Для проведения ПЦР используют буфер, содержащий Mg 2+. Mg 2+ необходим для образования комплексов с dNTP и работы полимеразы. В лабораторию привезли буфер с концентрацией 1 моль/л…

Чтобы решить эту задачу, давайте разберем её шаг за шагом.

Исходные данные:

• Объем буфера с Mg²⁺: 500 мл (это не нужно учитывать для дальнейших расчетов, так как мы рассматриваем только добавление праймеров).
• Объем реакционной смеси в одной пробирке: 25 мкл.
• Объем буфера в одной пробирке: 6 мкл.
• Количество пробирок: 20.
• Объем прямого праймера (C): 1 мкл на пробирку.

Шаг 1: Общий объем прямого праймера

Сначала вычислим общий объем прямого праймера, который нужно добавить для 20 пробирок.

\[ \text{Общий объем прямого праймера} = \text{Объем на пробирку} \times \text{Количество пробирок} = 1 \, \text{мкл} \times 20 = 20 \, \text{мкл}. \]

Шаг 2: Объем реакционной смеси

Теперь определим, сколько места остается для обратного праймера в каждой пробирке. Один пробирка содержит 25 мкл реакционной смеси, в которой уже есть 6 мкл буфера и 1 мкл прямого праймера.

Теперь давайте посчитаем, сколько всего места еще доступно для добавления обратного праймера:

\[ \text{Доступный объем для обратного праймера в одной пробирке} = \text{Общий объем реакционной смеси} - \text{Объем буфера} - \text{Объем прямого праймера} \] \[ = 25 \, \text{мкл} - 6 \, \text{мкл} - 1 \, \text{мкл} = 18 \, \text{мкл}. \]

Шаг 3: Добавление обратного праймера

Теперь, так как требуется добавить обратный праймер с такой же концентрацией Х, мы добавим также 1 мкл обратного праймера в каждую пробирку. Таким образом, на 20 пробирок нам также потребуется:

\[ \text{Общий объем обратного праймера} = 1 \, \text{мкл} \times 20 = 20 \, \text{мкл}. \]

Ответ

Таким образом, на каждую пробирку нужно добавлять 1 мкл обратного праймера, что в сумме на 20 пробирок составит 20 мкл.

Итог

• Объем, который нужно добавлять обратного праймера с такой же концентрацией Х: 1 мкл на пробирку, что в общей сложности: 20 мкл для 20 пробирок.